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ELISA試劑盒是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)
更新時間:2014-12-30   點擊次數(shù):1069次

    將抗原的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。
1.食品安全檢測ELISA試劑盒的操作原理:
ELISA的操作步驟:樣品收集保存、試劑準備、溫育、洗板、顯色、比色、包被、加樣、加酶標抗體、終止反應(yīng)、結(jié)果判定、
2.影響因素:
   分子量、穩(wěn)定性、純化、包被濃度,抗體純度和產(chǎn)品質(zhì)量
盡管ELISA測定的操作步驟非常簡單,但有可能會影響測定結(jié)果的因素卻較多,分布在測定操作的各步之中,尤以加樣、溫育和洗板為甚。為幫助大家分析查找測定中出現(xiàn)問題的可能原因,特對常見問題及原因歸納總結(jié)于下表。
臨床ELISA試劑盒測定中可能會出現(xiàn)的問題及可能的原因
問題可能的原因(非試劑盒本身的原因)
1.弱陽性質(zhì)控樣本檢測不出 溫育的時間或溫度不夠;顯色反應(yīng)時間太短;所用配制緩沖液的蒸餾水有問題
2.測定的重復(fù)性差 (相同樣本兩次測定結(jié)果不一致) 這是典型的由測定操作引起的問題,包括
(1)加樣本及試劑量不準;孔間不一致;
(2)加樣過快,孔間發(fā)生污染;
(3)加錯樣本;
(4)加樣本及試劑時,加在孔壁上部非包被區(qū);
(5)不同批號試劑盒中組分混用;
(6)溫育時間、洗板、顯色時間不一致;
(7)孔內(nèi)污染雜物;
(8)酶標儀濾光片不正確;
(9)血清標本未*凝固即加入,反應(yīng)孔內(nèi)出現(xiàn)纖維蛋白凝固或殘留血細胞,易出現(xiàn)假陽性反應(yīng)等。
3.白板
(陽性對照不顯色) (1)漏加酶結(jié)合物;
(2)洗板液配制中出現(xiàn)問題,如量筒不干凈,含酶抑制物(如疊氮鈉)等。
(3)漏加顯色劑A或B;
(4)終止劑當(dāng)顯色劑使用。
4.全部板孔均有顯色 (1)洗板不干凈;
(2)顯色液變質(zhì);
(3)加底物的吸光受酶污染;
(4)洗板液受酶等污染。
.3關(guān)鍵參數(shù)和功能幅度,相應(yīng)的性價關(guān)系
對于食品檢測ELISA試劑盒來說,進口的試劑盒在中國市場上比國產(chǎn)的試劑盒占的份額要大,國產(chǎn)的食品檢測ELISA試劑盒主要是在天然毒素上面,國產(chǎn)的食品檢測ELISA試劑盒是在檢測各種天然毒素上面。就市場上比較早食品檢測ELISA進口的主要是:R-biopharm、Neogen國產(chǎn)的試劑盒主要是:近來幾年市面上生產(chǎn)此類食品檢測ELISA檢測試劑盒的公司成長迅速,在中國市面上占份額大的幾個公司:長沙安迪、深圳綠詩源、三方圓、安圖,科華,索奧等 這幾個公司是的食品檢測ELISA試劑盒產(chǎn)品比較多,但是有很多以前做動物酶免檢測試劑盒的公司也正在進入食品安全檢測這個市場。
(5)是否需要生產(chǎn)商上門指導(dǎo)等復(fù)雜的
一般性食品檢測ELISA試劑盒的操作比較簡單,不需要生產(chǎn)商去上門指導(dǎo),而且實驗的成功率也大。
(6)產(chǎn)品是否成熟和試劑的穩(wěn)定性,供應(yīng)商和能否換貨等服務(wù)質(zhì)量
食品檢測ELISA試劑盒試劑已經(jīng)成熟,穩(wěn)定性好,在食品領(lǐng)域中的應(yīng)用還在擴大;一般在試劑盒出現(xiàn)問題的試劑,只要提供實驗報告和以及殘留試劑,經(jīng)廠家鑒定確實屬于試劑本身問題的,可以提供退換貨服務(wù)。

上海通蔚生物科技有限公司

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